如何正確對液相色譜儀進行檢定？
2022-04-18
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液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。
液相色譜儀的檢定方法：
1.秒表：分度值小于0.1s。
2.分析天平：zui大稱量200g，zui小分度值0.1mg。
3.容量瓶
4.微量注射器
5.標準物質和試劑
6.檢定方法：
a.泵流量設定值誤差Ss、流量穩定性誤差SR的檢定。將儀器的輸液系統、進樣器、色譜柱和檢測器聯接好，以甲醇為液動相，按表1設定流量，待流速穩定后，在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，準確地收集10～25分鐘，稱重，按下式計算Ss和SR。Ss=(Fm—Fs)/Fs×100%SR=(Fmax—Fmin)/F×100%式中Ss為流量設定值誤差(%)；Fm=(W2—W1)ρt·t為流量實測值；W2：容量瓶+流動相的重量(g)；W1：容量瓶的重量(g)；Fs：流量設定值(ml/min)；ρt：實驗溫度下流動相的密度(g/cm3)；t：收集流動相的時間(min)；SR：流量穩定性誤差(%)；Fmax：同一組測量中流量zui大值(ml/min)；Fmin：同一組測量中流量zui小值(ml/min)； F：同一組測量中的算術平均值(ml/min)。
b.定性、定量測量重復性的檢定 將儀器聯接好，使之處于正常工作狀態，用進樣閥的定量管注入適當的標準溶液(萘或聯苯)或穩定的待分析樣品溶液，記錄保留時間和峰面積，連續測量5次，按下式計算相對標準偏差RSD。
c.紫外檢測器性能
可調波長紫外-可見光檢測器波長示值誤差和重復性誤差的檢定將檢測器與記錄儀聯好，接通電源穩定后，先將檢測波長調至235nm，用甲醇用流動相，流速1.0ml/min，用進樣器注入重鉻酸鉀的硫酸溶液(取120℃干燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，搖勻，即得)20ul，待出峰時立即停泵，改用波長掃描方式，得到重鉻酸鉀在紫外-可見光區的吸收曲線，記錄其在235nm、257nm、313nm、350nm附近波長處的zui大或zui小吸收波長，分別找出各點zui大或zui小波長與標準波長之差即為波長示值誤差；重復測定3次，各點zui小與zui大值之差即為波長重復性誤差。
基線漂移和基線噪聲的檢定將儀器各部分聯接好，紫外檢測器波長調到254nm，流動相為100%甲醇，流速為1.0ml/min，吸收度范圍選擇較靈敏檔，開機，待基線穩定后，記錄基線30-40分鐘，計算基線漂移和噪聲。
較小檢測濃度在靜態條件下，用進樣器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，樣品峰高應大于或等于兩倍基線噪聲峰高，按下式計算zui小檢測濃度。 Cl=2×HN×C /H式中，Cl：zui小檢測濃度(g/ml)；HN：噪聲峰高(記錄儀器數或實測高度cm)；C：樣品濃度(g/ml)；H：樣品峰高(記錄儀器數或實測高度cm)。
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